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每50~100mg 组织加入0.2体积 TRIzol
1.加钢球1颗,设置研磨仪参数:12单位振频,1min,每种样品基本充分匀浆
2. 将上述匀浆液每0.2体积 TRIzol 试剂用量的匀浆液中加入0.04体积氯方,高通量组织研磨仪报价,盖紧管盖,手动剧烈震摇15 秒钟,然后室温静置2~3 分钟。
3. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。
4. 小心吸取上层水相(无色)加入到新试管中,同时计算所吸取的水相体积。
不必过多吸取,防止吸入DNA和蛋白杂质(中间层,白色)。
5. 加入所吸取水相等体积预冷的异丙淳,盖紧管盖,轻轻摇匀。
6. 室温静置10 分钟,待RNA 充分沉淀(为减少RNA 降解,此步骤可省略)。
7. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。
8. 将上清弃除(注意别丢弃沉淀),每管加入0.2体积75%乙醇润洗,盖紧管盖,轻轻晃动试管,以去除残留的异丙淳和盐份。
4℃ 7,500g 离心5 分钟。
9. 将上清弃除(注意别丢弃沉淀),打开管盖,将RNA 沉淀干燥(室温挥发或真空干燥)。
注意RNA 沉淀不可完全干燥,否则难以溶解。
10. 将RNA 沉淀溶解于适量的无RNase 水中。
如果RNA 沉淀溶解不完全,将使OD260/OD280≤1.6。
此RNA 溶液可用于进一步实验,或者-70℃保存。
组织研磨机的性能
北京旭鑫盛科公司主营各种研磨仪,粉碎仪,破碎仪,筛分仪等前处理设备,如需了解更多详情,欢迎与我们交流!
在1-3分钟内可以同时对2、48、192个样品进行快速、有效的研磨;
通过预冷冻样品和研磨罐,可以成功地对热敏性和弹性材料进行研磨,将样品和研磨套件浸入液氮中,充分冷冻后将研磨罐快速固定开始研磨
可选择多样离心管、PCR管适配器,或者不同材质的研磨罐
8字形振动,样品研磨无死角
简单、安全的操作设计
精致、小巧的外形
旋盖研磨罐,密封,防尘
自动中心定位和安全锁紧
适用于多种样品的干磨、湿磨
分隔设计,使用封闭式的研磨罐或一次性的离心管,避免样品交叉污染。
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DNA的粗提
1) 将高通量组织研磨仪研磨好的样品取出于65℃水浴45min,中途间隔(轻柔)振荡三次混匀;
2) 冷却后加入等体积:易戊醇(24:1),高通量组织研磨仪,轻柔颠倒混匀使乳化10min;
3) 7000g-8000g离心10min(18-20℃);
4) 吸取上清于另一干净的离心管中;
5) (根据需要可用氯放:易戊醇如上法重复抽提一次,吸取上清);
6) 加入与上清液等体积
7) 离心法沉淀DNA;
8) 在75%乙醇中漂洗DNA数分钟以上,用Tip头吸干乙醇;
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次;
10) 沉淀于室温或64℃以下的恒温箱中干燥片刻至刚出现半透明,不要过度干燥;
11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,高通量组织研磨仪多少钱,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
利用高通量组织研磨仪对要进行DNA提取的植物样品研磨的好处在于:研磨过程中,高通量组织研磨仪公司,不会对植物组织造成破坏,可根据需要选择干磨、湿磨及冷冻研磨,封闭式的样品管,避免样品交叉污染。
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